En vetenskaplig metod för att kvantifiera NMN i biologiska prover
1. Inledning
Tillskott av nikotinamidmononukleotid (NMN) för att uppreglera nivån av nikotinamid adenindinukleotid (NAD+) har presenterats som en lovande anti-aging-intervention. Det är dock fortfarande en stor utmaning att exakt kvantifiera NAD+ intermediärer, NMN (NMN) i synnerhet. Denna studie är utformad för att introducera en ny metod, dubbelisotopmedierad LC-MS/MS-metodik (dimeLC-MS/MS), för exakt kvantifiering av NMN (NMN) i biologiska prover.
2. Faktorer som påverkar den exakta detektionen av NMN
NMN är svårt att exakt detektera på grund av dess sårbarhet för enzymatisk nedbrytning, omvandling vid provbearbetning, dess komplexa beteenden i olika kolonn- och extraktionsförhållanden, såväl som matriseffekt.
Specifikt har NMN egenskaperna hög polaritet och låg flyktighet, vilket är lätt att lösa upp i vatten men svårt att lösa upp i organiska lösningsmedel. Dessa egenskaper begränsar i hög grad tillämpningen av många konventionella kvantitativa analysmetoder.
BIologiska prover såsomblod har signifikanta effekter av CD38 och CD73 (ecto-5’-nukleotidas), som båda skulle kunna använda NMN som substrat.
Beteendet hos NMN i kolonnen är mycket komplext, förmodligen på grund av den bipartita karaktären hos dess laddningar, så att subtila skillnader i extraktion och kolonnförhållanden avsevärt påverkar den tillförlitliga och exakta detektionen av NMN.
3. Copingstrategier för dimeLC-MS/MSför att minska effekterna av påverkansfaktorer
För att undvika interferens av ovan nämnda faktorer används en prototypkolonn NMN-2. Denna kolonn innehåller C18-baserade kiseldioxidpartiklar med hög renhet som är mer kapabla att binda hydrofila föreningar än kolpartiklar, vilket förbättrar separationsförmågan.
Perklorsyra (PCA) används eftersom den effektivt kan extrahera NAD+ och NMN från biologiska prover som plasma med minimala förluster.
För att justera för matriseffekter tillsätts en fast mängd (1 μM) av varje isotopförening till biologiska prover före PCA-extraktionen.
4. Fördelensav dimeLC-MS/MS
Dubbelisotopiska NMN-standarder, NMN (M + 14) och NMN (M + 5), i den LC-MS/MS-drivna metodiken kan exakt spåra NMN:s öde under provbearbetning, vilket avsevärt ökar noggrannheten och tillförlitligheten för NMN-mätning i biologiska prover. Dessutom kan dimeLC-MS/MS utvärdera extraktionseffektiviteten och de absoluta koncentrationerna av NMN i olika typer av biologiska prover.
5. Slutsats
Þvaranya LC-MS/MS-driven metodik med dubbla isotopiska NMN-standarder kan noggrant och tillförlitligt mäta NMN i biologiska prover.Den kan användas för framtida studier av NMN-intag.
6. Hänvisning
Unno, Junya et al. "Absolut kvantifiering av nikotinamidmononukleotid i biologiska prover med dubbelisotopmedierad vätskekromatografi-tandemmasspektrometri (dimeLC-MS/MS)." npj åldrande vol. 10,1 2. 2 jan. 2024, doi:10.1038/s41514-023-00133-1
Varför välja BONTAC?
BONTAC är ledare för den globala NMN (NMN) industri. Vi har den första katalystekniken för hela enzymer i Kina och har blivit det ledande företaget inom koenzymprodukter som används i stor utsträckning inom hälsoindustrin, medicin och skönhet, grönt jordbruk, biomedicin och andra områden. Noterbart är att BONTAC är NMN (NMN) råvaruleverantör till det berömda David Sinclair-teamet vid Harvard University. Våra tjänster och produkter är pålitliga. Dessutom BONTAC har ett oberoende forskningscenter för koenzymteknik på provinsnivå i Kina och självägda fabriker, där produkternas renhet och stabilitet kan säkerställas.
Friskrivning
Þvara Artikeln ärbaserat på Hänvisningen iAkademisk tidskrift. Den relevanta informationen är förse endast för att dela med sig och lära sig, och representerar inte några medicinska rådgivningsändamål. Om det finns någon överträdelse, vänligen kontaktFörfattaren förTa bortjon. De åsikter som uttrycks i denna artikel representerar inte den ståndpunkt som BONTAC.